填充劑的要求

　　zui常用的色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠（如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等）也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑；分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑；對映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。 

　　填充劑的性能（如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團的表面覆蓋度、含碳量和鍵合類型等）以及色譜柱的填充，直接影響供試品的保留行為和分離效果?？讖皆?5nm（1nm=10Å）以下的填料適合于分析分子量小于2000 的化合物，分子量大于2000 的化合物則應(yīng)選擇孔徑在30nm 以上的填料。除另有規(guī)定外，分析柱的填充劑粒徑一般在3μm~10μm 之間。粒徑更小（約2μm）的填充劑常用于填裝微徑柱（內(nèi)徑約2mm），使用微徑柱時，輸液泵的性能、進樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配；如有必要，色譜條件也需作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時，應(yīng)以品種正文規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。

 

溫度的要求

　　以硅膠為載體的普通鍵合固定相的使用溫度通常不超過35℃，為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的使用溫度，但不能超過60℃。

 

流動相的要求

　　流動相的pH 值應(yīng)控制在2～8 之間。當(dāng)pH 值大于8 時，可使載體硅膠溶解；當(dāng)pH 值小于2 時，與硅膠相連的化學(xué)鍵合相易水解脫落。當(dāng)色譜系統(tǒng)中需使用pH 值大于8 的流動相時，應(yīng)選用耐堿的填充劑，如采用高純硅膠為載體并具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠填充劑、包覆聚合物填充劑、有機-無機雜化填充劑或非硅膠填充劑等；當(dāng)需使用pH 值小于2 的流動相時，應(yīng)選用耐酸的填充劑，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑，或有機-無機雜化填充劑等。